CD40 siRNA对MRL／Lpr小鼠狼疮肾炎的治疗作用

• 作者: 吕凤凤 尹芳蕊 庞春艳 王永福
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD40 小干扰RNA MRL/Lpr小鼠 24 h尿蛋白 补体C3
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 1089-1093
• 页数: 5页
• 分类号: R593
• 字数: 2967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.08.020

摘要

目的：：观察CD40的小干扰RNA( siRNA）对系统性红斑狼疮( SLE）动物模型MRL／Lpr小鼠肾脏、尿蛋白和补体C3的影响，探讨CD40 siRNA对狼疮肾炎的治疗作用。方法：16只MRL／Lpr小鼠随机分为对照组、空载体组、CD40-siRNA1组及CD40-siRNA2组，每组4只，将成功构建的CD40 siRNA表达载体尾静脉注射MRL／Lpr小鼠，对照组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液( PBS）和pGFP-V-RS空载体。每隔1天1次，共6次。处死前24 h留取24 h的尿量。14 d处死小鼠，肾脏组织切片在荧光显微镜下观察其是否在小鼠肾脏中表达， RT-PCR法检测小鼠肾脏组织中CD40 mRNA的表达水平；免疫组化法检测小鼠肾脏组织中CD40蛋白的表达水平；病理切片苏木精-伊红( HE）染色法观察4组小鼠肾脏的病理变化，考马斯亮蓝染色法检测24 h尿蛋白含量，免疫比浊检测小鼠补体C3的水平。结果：CD40 siRNA表达载体可以在MRL／Lpr小鼠的肾脏中表达。注射后14 d CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组的MRL／Lpr小鼠肾脏组织中CD40 mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组，差异有统计学意义( P＜0.05）。 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组与对照组和空载体组比较肾小球减小，肾小球的浸润的炎性细胞减少，肾小管肿胀程度减轻。 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组小鼠24 h尿蛋白含量明显下降，而补体C3升高，与对照组和空载体组比较差异有统计学意义( P＜0.05）。结论：MRL／Lpr小鼠注射CD40 siRNA载体后， CD40 mRNA和蛋白的表达水平下降，肾脏中炎性细胞的浸润减少，24 h尿蛋白含量下降，血清中补体C3水平升高，说明CD40 siRNA抑制其mRNA和蛋白后，MRL／Lpr小鼠肾脏炎症反应减轻，尿蛋白含量下降，补体C3升高，提示其可延缓病程的进展，对肾脏起到一定的保护作用，进一步对狼疮肾炎有很好的治疗作用。