表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗增强DC活性

• 作者: 刘丽华 单保恩 张超 武立华 艾军
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD40L基因 树突状细胞 结肠癌细胞 基因转染
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 514-520
• 分类号: R735.3+5|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.05.006

摘要

目的:观察表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗体内外对DC活性的影响.方法:以脂质体法将CD40L基因转染colon26细胞获得稳定表达CD40L的colon26/CD40L瘤苗.colon26/CD40L细胞与小鼠骨髓来源DC共培养,流式细胞术检测DC表型变化,RT-PCR法检测细胞因子基因P19、P35、1940、IL-18和,IFN-γ的表达,ELISA法检测共培养上清中IL-12、IL-23和IFN-γ的水平.BALB/c小鼠皮下注射colon26细胞制备荷瘤小鼠模型,colon26/CD40L致敏DC治疗荷结肠癌小鼠,ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中IL-12、IL-23、IFN-γ、IL-10和TGF-β的水平,H-E染色观察肝、脾和肿瘤组织的病理学变化.结果:成功获得高表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的colon26/CD40L瘤苗.Dc与colon26/CD40L瘤苗共培养后,DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHC Ⅰ和MHC Ⅱ表达增高(P<0.01);共培养体系中可检测到P19、P35、P40、IL-18和IFN-γmRNA的表达,而在其他组未检测到上述基因的表达;共培养细胞上清中有较高水平的IL-12、IL-23和IFN-γ(P<0.01).co-lon26/CD40L瘤苗致敏DC治疗组与colon26/CD40L瘤苗治疗组、DC治疗组比较,小鼠移植瘤的体积和质量明显减小和减少(P<0.05);小鼠外周血IL-12、IL-23和IFN-γ明显升高(P<0.01),IL-10和TGF-β明显降低(P<0.01);小鼠移植瘤组织病理变化显著减轻.结论:表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的结肠癌瘤苗可促进DC的成熟,刺激DC分泌细胞因子,增强DC体内外活性,从而增强治疗体系的抗肿瘤免疫效应.