诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定

• 作者: 刘庆堂 张改平 张磊 李青梅 柴书军 职爱民 赵东 邓瑞广
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 诺氟沙星 单克隆抗体 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 716-720
• 分类号: S851.4
• 字数: 3341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.09.14

摘要

为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备MFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定.结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1:512,腹水效价为1:6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性.本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLX MAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础.