油菜毛状体发育相关基因GLA BRA 2启动子的克隆与功能验证

• 作者: 刘胜毅 柴国华 汪承刚 白泽涛 石磊 董彩华 许李明 郭学兰
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝型油菜 GLA BRA 2启动子 基因组步移 拟南芥 GUS表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 210-217
• 分类号: S6
• 字数: 5005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.02.002

摘要

GLABRA2(GL2)基因在拟南芥毛状体发育中具有重要作用.实验利用基因组步移巢式PCR的方法,通过两次步移克隆得到一个油菜(Brassica napus)GL2基因启动子序列,序列分析发现它与拟南芥GL2启动子同源性较差,但有一些共同的顺式作用元件如MYB结合位点、G box等,也有油菜GL2基因所特有的应答元件如E-box.将其中具有启动子的基本特征的序列GP1与GUS报告基因融合构建重组载体pBI121-GP1,转化拟南芥(Arabidopsis).用卡那霉素筛选得到10株阳性苗.在T2代转基因株系中有6个株系的绿苗与黄花苗的比例都接近3:1,推定T-DNA是以单拷贝的形式插入拟南芥基因组DNA.GUS组织化学染色表明,GP1调控下报告基因主要在子叶、真叶的表皮毛以及根部的幼嫩组织中表达,与拟南芥GL2基因启动子表达模式基本一致,但也有明显不同:油菜GL2启动子GP1只在表皮毛发育早期强烈表达,而拟南芥GL2启动子调控表皮毛发育的整个过程.