龋齿DNA疫苗(PGJAP)中污染大肠杆菌噬菌体的检测方法的建立

• 作者: 张爱华 王炯 罗丹 赵亚杰 闭兰 马荣华 齐建新
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: DNA疫苗 大肠杆菌噬菌体 噬菌斑法
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 36-39
• 分类号: R781.1
• 字数: 2741字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-5673.2010.02.008

摘要

龋齿DNA疫苗工程菌采用的大肠杆菌DH-5α在生产过程中极易污染大肠杆菌噬菌体,所以应对原始菌种、主菌种和工作菌种及大量生产时的发酵液作大肠杆菌噬菌体检测. 用大肠杆菌噬菌体VCSM13为标准噬菌体株,对大肠杆菌C3000和DH-5α分别作噬菌斑检测和pfu值计算,验证并确定以VCSM13作为标准噬菌体株,C3000作为检测菌株,对龋齿DNA疫苗原始菌种、主菌种(第一代)、工作菌种(2007001)和其发酵液(200703)分别作噬菌体检测,并建立了检测大肠杆菌噬菌体的直接噬菌斑法.结果显示VCSM13在DH-5α的噬菌斑计数为76,pfu/ml为7.6×1013,C3000的噬菌斑计数为81,pfu/ml为8.1×1013,龋齿DNA疫苗的原始菌种、主菌种、工作菌种和发酵液,噬菌斑计数全部为0.Pfu也为0.阳性对照为74,pfu/ml是7.4×1013,阴性对照为0. 通过对阳性对照样本作增殖法试验及挑斑接种验证后,证明此法操作简单,灵敏度高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张爱华		38	127	6.0	8.0
2	闭兰		31	88	5.0	6.0
3	赵亚杰		16	33	3.0	4.0
4	罗丹		6	6	1.0	2.0
5	齐建新		2	4	1.0	2.0
6	王炯		3	5	1.0	2.0
7	马荣华		1	3	1.0	1.0