嗜水气单胞菌外膜蛋白(OMP)的原核表达及其对BALB/c小鼠的免疫保护研究

• 作者: 李卫芬 李梅 沈文英 胡春霞 许梓荣
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 原核表达 小鼠 免疫保护
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 218-224
• 分类号: Q1
• 字数: 5205字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.02.003

摘要

为确定嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)AS1.927株外膜蛋白(OMP)的原核表达产物是否具有抗原性及其对小鼠的免疫保护力.本研究根据GenBank上嗜水气单胞菌外膜蛋白ompA基因序列(GenBank登录号:AF146597)设计1对引物,克隆出ompA全长基因1020 bp(GenBank登录号:EU309491),经Sal Ⅰ和Xhol Ⅰ双酶切后连接pET-30a(+),转化大肠杆菌(Escherichia cDli)BL21,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE及Westernblot分析鉴定.结果显示重组基因工程菌E.coli[pET-30a-ompA]表达的融合蛋白分子量约为40.7kD,可以被鼠抗嗜水气单胞菌外膜蛋白抗血清识别.将重组基因工程菌Ecoli[pET-30a-om-pA]口服免疫BALB/c小鼠(Mus mussulus);末次免疫1周后用放射免疫分析小鼠肠粘膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平,检测结果揭示,该重组基因工程菌能提高sIgA的分泌(P<0.05);同时在小鼠血清中测出特异性抗体IgG(P<0.05).末次免疫2周后用100 LD50的Ah AS1.927(3.3×105> cfu/mL)腹腔注射攻击小鼠,口服重组菌对小鼠的相对免疫保护力(relative percent survival,RPS)为75%,表明重组基因工程菌可诱导小鼠对AhAS1.927产生一定的免疫保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李卫芬	浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室	114	2074	25.0	39.0
2	许梓荣	浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室	443	7811	42.0	59.0
3	李梅	浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室	41	416	12.0	18.0
4	沈文英	绍兴文理学院生命科学学院	48	928	18.0	29.0
5	胡春霞	浙江大学教育部动物分子营养学重点实验室	13	42	4.0	5.0