靶向表皮生长因子受体shRNA表达载体的构建和鉴定

• 作者: 刘彦群 王慧 魏志平
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮生长因子受体 RNA干扰 短发卡状RNA 转染
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 分类号: R739.5
• 字数: 2995字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2010.05.012

摘要

目的 构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定.方法 ①根据人类EGFR的mRNA序列,设计4条干扰片段,以PGPU6/GFP/Neo质粒为载体,构建shRNA重组体,转化入DH5a大肠杆菌,提取质粒,进行酶切和测序鉴定;②采用脂质体Lipofectamin 2000分别转染人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞,用G418筛选阳性克隆.结果 ①经酶切及测序鉴定,成功构建了针对 EGFR的4个重组干扰质粒;②成功转染Colo-16细胞,经筛选后得到稳定表达的细胞克隆.结论 利用 RNAi技术原理成功构建针对 EGFR的shRNA重组质粒,并转染入Colo-16细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧	徐州医学院附属医院皮肤科	29	138	7.0	10.0
2	魏志平	徐州医学院附属医院皮肤科	96	239	8.0	9.0
3	刘彦群	徐州医学院附属医院皮肤科	103	374	8.0	15.0