利用电转化法构建烟草野火病菌的Tn 5插入突变体

• 作者: 李江利 焦伟 蒋士君 陈红
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草野火病菌 电转化 Tn5插入突变 功能突变体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 322-325
• 分类号: S432.42
• 字数: 3446字
• 语种: 中文

摘要

采用电转化法将含有kanr基因标记的EZ::Tn 5转座子插入到烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv. tabaci)的基因组中.结果表明,在电压为2 400 V条件下,供试的烟草野火病菌菌株SMX 006及WT 4的电转化效率分别为0.8×103,4.2×103 cfu·μg-1 DNA.转化电压下降至1 800 V时,WT 4菌株的转化效率也随之下降至1.64×103 cfu·μg-1 DNA.对转化子进行kanr筛选以及特异性PCR鉴定,表明Tn 5可以稳定地插入到受体菌的基因组中.对烟草野火病菌SMX 006的Tn 5插入突变体进行了多次致病性﹑运动性和胞外蛋白酶活性测定,从中获得了2个致病力明显减弱的突变株(H 028,H 029)、1个运动能力明显减弱的突变株(H 028)、1个运动能力丧失的突变株(H 029)、1个产胞外蛋白酶能力明显减弱的突变株(H 046),以及1个胞外蛋白酶缺失的突变株(H 045).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋士君	河南农业大学植物保护学院	44	448	12.0	19.0
2	焦伟	河南农业大学植物保护学院	3	10	2.0	3.0
3	陈红	河南农业大学植物保护学院	2	11	2.0	2.0
4	李江利	河南农业大学植物保护学院	3	10	2.0	3.0