MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的制备及其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用

• 作者: 刘新建 徐萍 钱其军 黄倩
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MDA-7/IL-24 HaloTag 融合蛋白 肝肿瘤 大肠肿瘤 凋亡
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 386-391
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.04.005

摘要

目的:构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒,制备MDA-7/IL-24-H17融合蛋白,研究该融合蛋白在肿瘤细胞内的定位及其对肿瘤细胞致凋亡作用.方法:PCR扩增MDA-7/IL-24基因,插入含有HaloTag(HT7)标签的载体中,构建MDA-7/IL-24-HT7原核及真核表达质粒;MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白经IPTG诱导表达后纯化.利用带有荧光标记的HT7配基观察MDA-7/IL-24-HT7在肿瘤细胞内的定位.MTY法及AnnexinV-PI染色法检测MDA-7/IL-24-HT7对肿瘤细胞生长和凋亡的影响.结果:成功构建了表达MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白的原核及真核表达质粒,MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白主要存在于E coli BL21的包涵体内.MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白定位于肿瘤细胞的内质网上.MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞的生长,1 mg/ml MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白作用大肠癌HCT116细胞、肝癌SMMC7721细胞96 h后,细胞凋亡率分别为(34.7±1.3)%和(22.1±0.9)%,显著高于未处理的肿瘤细胞(P<0.01).结论:带有HaloTag标签的MDA-7/IL-24-HT7融合蛋白可抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘新建	上海交通大学癌基因及相关基因国家重点实验室	3	6	2.0	2.0
7	黄倩	上海交通大学附属第一人民医院中心实验室	27	74	4.0	7.0
11	徐萍		1	2	1.0	1.0