应用LAMP技术鉴定含89K毒力岛2型猪链球菌菌株

• 作者: 余昭 卢亦愚 张政 朱水荣 杨婷婷 梅玲玲 王志刚
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 89K毒力岛基因 猪链球菌2型 改良LAMP技术 鉴定检测
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 659-662,667
• 分类号: R378.1
• 字数: 3037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.07.011

摘要

目的 应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)技术鉴别含89K毒力岛2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)菌株.方法 根据S.suis 2中国分离株(05ZYH33)89K毒力岛中基因序列设计4条引物(2条内引物、2条外引物);应用LAMP,对21株S.suis 2、18株其它链球菌、9株葡萄球菌、5株其它菌株及49份未知样本进行检测,并对LAMP的最低检测限进行测试,结果通过肉眼目测或电泳检测,并将结果与PCR/定量PCR结果比较.结果 该方法仅对含89K毒力岛的中国S.suis 2特有株检测为阳性,而其它菌株经LAMP检测均为阴性,试验表明本方法特异性好,其最低检测限为24CFU/反应,无需特殊设备,结果通过肉眼即可判断,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2h左右.应用本方法对49份不同来源样本进行实际考核,其中32份不明发热病人呼吸道咽拭子应急样本及15份正常猪扁桃体咽拭子样本经检测89K毒力岛基因均为阴性,2份疑似SS2病人血液应急样本中一份检测到该毒力岛基因,该结果与普通PCR/定量PCR检测结果一致.结论 成功建立了检测S.suis 2 89K毒力岛的LAMP方法,该方法特异性好,操作简便,无需特殊的仪器设备,操作简单方便,极适合在我国广大基层实验室(包括基层医院/动物检疫等部门)开展应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅玲玲		83	735	14.0	25.0
2	王志刚		22	299	7.0	17.0
3	卢亦愚		127	1020	16.0	23.0
4	余昭		46	645	15.0	24.0
5	朱水荣		59	269	10.0	12.0
6	张政		65	309	10.0	13.0
7	杨婷婷		19	143	7.0	11.0