5-氮杂胞苷对Eca109细胞增殖及RUNX3基因表达的影响

• 作者: 冯耀光 王元星 贺大璞 韦兵 龙超众
• 来源期刊: 南华大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: Eca109 RUNX3基因 5-氮杂胞苷 去甲基化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 肿瘤学研究
• 页码范围: 345-349
• 分类号: R735.1
• 字数: 3811字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2010.03.013

摘要

目的 探讨去甲基化制剂5-氮杂胞苷(5-azaC)干预对Eca109细胞增殖及其抑癌基因RUNX3表达的影响.方法 应用MTT法来观察5-azaC对Eca109细胞增殖的抑制能力;采用10 μmol/L、20 μmol/L和50 μmol/L 3种不同浓度的5-azaC处理Eca109细胞株,采用MSP检测干预前后RUNX3基因启动子区的甲基化状况;应用RT-PCR、Western blotting检测干预前后RUNX3基因的mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 Eca109细胞RUNX3基因启动子区处于异常的高甲基化状态,经5-azaC处理后,高甲基化的RUNX3基因启动子部分去甲基化;处理前启动子高甲基化的RUNX3基因其mRNA或蛋白均不表达,去甲基化处理后能重新激活该基因表达,经3种不同浓度5-azaC处理后,Eca109细胞生长减慢.结论 启动子区高甲基化是食管癌Eca-109细胞RUNX3基因失活的主要原因之一, 5-azaC能逆转RUNX3基因甲基化状态, 从而调控RUNX3基因表达并抑制细胞生长.