人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用

• 作者: 周瑞敏 姜惠英 徐琨 楚雍烈 王新 王桂荣 田婵 石崧 石琦 董小平
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: doppel蛋白 朊蛋白 细胞毒性作用 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 32-35,46
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的 体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白--截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较.方法 通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态.结果 两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞Annexin V/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低.结论 瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程.