玉米弯孢霉叶斑病菌均一化全长cDNA文库构建与鉴定

• 作者: 侯巨梅 刘力行 刘志诚 刘铜 周斐红 陈捷 高士刚
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 均一化 cDNA文库 弯孢霉 菌丝
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 250-257
• 分类号: S435.131
• 字数: 5109字
• 语种: 中文

摘要

利用DSN(duplex-specific nuclease)均一化与SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术构建玉米弯孢霉叶斑病菌菌丝的均一化全长cDNA文库.经检测原始文库的滴度为1.4×106 pfu/mL,重组率为96.9%,插入片段平均长度大于1.0 kb.从文库中随机挑取192个cDNA克隆测序,获得173个高质量的EST序列,其中有5个跨叠群(conting),168个独立克隆,全长cDNA克隆占57%.BLASTx分析表明,有18.5%EST与GenBank中无任何同源性,有81.5%EST与GenBank中报道的功能已知或末知蛋白具有相似性.