重组hTGF-β1基因转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究

• 作者: 丁文龙 刘伟 周广东 夏万尧 崔磊 曹谊林 王毅敏 钟梅芳
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 基因转染 腺病毒 转化生长因子β1 猪
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 297-301,306
• 分类号: R322.7+1
• 字数: 4706字
• 语种: 中文

摘要

目的 重组hTGF-β1腺病毒(adeno-hTGF-β1)转染的BMSCs在体内成软骨能力的初步研究,探讨其作为组织工程化软骨的种子细胞的可行性.方法 重组adenc-hTGF-β1转染猪BMSCs,酶联免疫吸附定量检测(ELISA法)重组腺病毒转染hTGF-β1蛋白的表达.然后消化收集重组腺病毒转染后的BMSCs,均匀接种于圆盘状PGA支架上,对照组转染adeno-LacZ,然后植入裸鼠背部皮下,在植入后第3周取材,分别行大体观察、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化和蛋白聚糖含量检测对形成组织进行评价.结果 ELISA结果 显示adeno-hTGF-β1转染的BMSCs,其hTGF-β1表达量是转染adeno-lacZ的BMSCs 2.65倍(P<0.05).植入裸鼠体内后3周取材,实验组HE染色观察可见有软骨形成,但较不均匀,并被纤维组织分割,形成的软骨组织区域可见软骨细胞包埋在软骨陷窝内;对照组可见仅有少量软骨形成,被大量的纤维组织和未降解的PGA支架包裹,实验组和对照组形成软骨占总组织百分比,分别为(41.83±4.64)%和(17.50±2.85)%,P<0.05.Safranin'O染色显示,实验组形成的软骨组织区域都有被染成桔红色蛋白多糖类基质分泌,着色比对照组更深.实验组形成的软骨组织区域有大量棕黄色的Ⅱ型胶原颗粒,而对照组仅有少量的棕黄色的Ⅱ型胶原颗粒,实验组形成的软骨组织中的蛋白聚糖含量多于正常猪耳软骨.结论 重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs作为种子细胞,在裸鼠体内能促使软骨组织形成,从而为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程应用中奠定了基础.