小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区的克隆、表达及生物活性分析

• 作者: 刘明耀 罗剑 翟春燕
• 来源期刊: 生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠核因子κB受体活化因子配基 基因克隆 原核表达 破骨细胞分化
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 790-798
• 页数: 9页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

核因子κB受体活化因子配基是诱导破骨细胞分化、成熟的关键因子,在生物医学研究中应用广泛.本实验以小鼠的骨髓细胞cDNA为模板,采用PCR技术获得小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区基因,并将该基因克隆至His标签的融合蛋白表达载体pET28a(+),经鉴定正确的质粒转化至BL21表达菌株中.通过调节诱导目的蛋白表达的培养温度、TPTG浓度及诱导时间,筛选出重组融合蛋白表达的最佳条件.将纯化后的重组蛋白稀释成不同浓度,刺激小鼠破骨前体细胞Raw264.7细胞分化,经抗酒石酸酸性磷酸酶染色后可见破骨细胞的形成,表明该重组蛋白具有较好的生物活性,可替代商品化的鼠源核因子κB受体活化因子配基.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟春燕		1	0	0.0	0.0
2	刘明耀		8	4	1.0	2.0
3	罗剑		6	41	4.0	6.0