siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用

• 作者: 张雪萍 汪运山 肖东杰 赵云 郏雁飞 郑燕 马晓丽
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α5-尼古丁乙酰胆碱受体(CHRNA5) siRNA 肺癌 尼古丁 增殖
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 604-608
• 分类号: R734.2|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.06.003

摘要

目的:研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5(cholinergic receptor nicotinic alpha 5,CHRNA5)基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响.方法:设计并合成CHRNA5-siRNA片段,并经脂质体介导转染A549细胞.荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中CHRNA5 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测CHRNA5-siRNA对尼古丁促A549细胞增殖作用的影响.结果:成功构建了CHRNA5-siRNA并成功转染A549细胞.CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5 mRNA表达量明显低于si-NC转染对照组(0.196±0.044 vs 0.944±0.027,P＜0.01),CHRNA5-siRNA转染组A549细胞的CHRNA5蛋白表达量明显低于si-NC转染组(0.267±0.031 vs 0.745±0.035,P＜0.01).在无尼古丁作用时,CHRNA5-siRNA的转染不能抑制A549细胞的增殖.在尼古丁作用下,A549细胞增殖显著增加(P＜0.01),CHRNA5-siRNA转染可明显抑制尼古丁的促增殖作用(P＜0.01).结论:siRNA下调肺癌A549细胞中CHRNA5的表达可以抑制尼古丁促细胞增殖作用,CHRNA5可能是肺癌治疗的潜在靶点之一.