日本囊对虾Ran基因的克隆表达与蛋白质GTP结合活性分析

• 作者: 王志勇 韩芳
• 来源期刊: 集美大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 日本囊对虾 Ran基因 RACE-PCR 蛋白表达 GTP活性
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 241-247
• 分类号: Q52
• 字数: 4779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7405.2010.04.001

摘要

在日本囊对虾抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)研究过程中,首次发现一段经同源比较为Ran基因的部分序列,在抗病日本囊对虾中上调表达.为了进一步探索日本囊对虾Ran基因的功能,通过RACE-PCR的方法克隆得到了日本囊对虾Ran基因全长共1 441个碱基,其中开放阅读框为645个碱基,共编码215个氨基酸,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因.还将该基因克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中并转化大肠杆菌BL21,37 ℃下诱导6 h,超声裂解表达菌株,结果表明GST-Ran融合蛋白在大肠杆菌中为可溶性表达,蛋白大小约为50 ku,经纯化得到了纯度大于90 %的GST-Ran融合蛋白.随后的GTP结合试验验证了Ran蛋白具有GTP结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志勇	集美大学水产学院	86	1707	22.0	39.0
3	韩芳	集美大学水产学院	9	53	3.0	7.0