前列腺癌组织中DLC-1启动子甲基化定量检测的HRM方法建立及其应用意义

• 作者: 关明 刘瑞来 张心菊 郭林 顾小叶 马玮哲
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 肿瘤抑制蛋白质类 启动区(遗传学) 甲基化
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 205-208
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3593字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.03.003

摘要

目的 建立HRM技术定量检测DLC-1启动子甲基化的方法 ,并分析探讨DLC-1甲基化程度与前列腺癌病理参数的相关性.方法 选取89份前列腺癌组织以及10份匹配癌旁组织标本,采用LCM收集肿瘤细胞群,抽提DNA后进行甲基化修饰.以CpGenome Universal Methylated DNA作为100%甲基化样本,以100%非甲基化的健康人外周血DNA作为稀释剂,分别制成100%、80%、50%、30%、10%、0%系列浓度的标准曲线,并进行重复性和灵敏性评价.同时用HRM技术定量检测前列腺癌细胞中DLC-1甲基化水平,探讨DLC-1甲基化程度与前列腺癌患者年龄、PSA水平与前列腺癌TNM的关系.结果 100%、80%、50%、30%、10%、0%甲基化标准品的HRM熔解曲线从右往左依次排列,10份癌旁组织标本、35份前列腺癌组织标本重叠在0%标准曲线上;5份前列腺癌组织标本位于0%～30%区域内,29份位于31%～80%区域内,20份位于81%～100%区域内.HRM技术最低检测限可达10%的甲基化水平,优于MSP检测(30%甲基化水平).DLC-1甲基化水平与前列腺癌患者年龄无明显相关(X~2=3.29,P=0.19),与PSA水平也无相关性(X~2=2.04,P=0.36),但DLC-1甲基化水平与TNM分期显著相关(X~2=9.04,P=0.01),且随TNM分期增高而增高.结论 成功建立的HRM技术定量检测DLC-1甲基化水平的方法 稳定、灵敏、操作简单,DLC-1启动子甲基化有望成为评估前列腺癌TNM的分子指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭林	复旦大学附属肿瘤医院检验科	38	413	11.0	19.0
2	关明	复旦大学附属华山医院检验科	105	460	10.0	15.0
3	张心菊	复旦大学附属华山医院中心实验室	21	145	7.0	11.0
4	顾小叶	复旦大学附属华山医院中心实验室	8	59	5.0	7.0
5	马玮哲	复旦大学附属华山医院中心实验室	8	53	5.0	7.0
6	刘瑞来	复旦大学附属华山医院检验科	5	11	2.0	3.0