MyD88siRNA诱导猪调节性树突状细胞的实验研究

• 作者: 刘中民 周谦君 范慧敏
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 猪树突状细胞 RNA干扰 脂质体转染 MyD88
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 415-421
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

采用siRNA干扰猪外周血单核细胞来源DC(monocyte-derived DC,MoDC)髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)基因的表达,检测干扰前后的细胞表型,免疫学功能及生物学活性,探讨猪调节性DC诱导耐受的机制.提取猪外周血单核细胞(peripheral blood monocyte,PBMC),经GM-CSF和IL-4诱导,体外培养得到未成熟MoDC.通过化学合成法制备针对MyD88基因siRNA 2对,在LipofectamineTM RNAiMax转染试剂介导下转染MoDC,Western blot法及Real-time PCR检测干扰前后MyD88基因的表达水平.培养至第五天将DC分为四组:对照组、LPS组、干扰1组和干扰2组,继续培养3天.siRNA干扰后,MyD88 mRNA和蛋白质表达水平下降80%;MyD88siRNA序列1和序列2干扰后MoDC CD80/86、SLA-Ⅱ表达降低,MLR显示刺激指数下降,IFN-γ降低,IL-4增高,与LPS组差异均具有统计学意义(P<0.05).脂质体介导siRNA技术能干扰猪MoDC的MyD88基因,阻断TLR信号传导途径,抑制DC成熟,获得耐受性DC,表现为对同种异体T细胞的刺激能力降低,诱导免疫反应向Th2偏移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范慧敏		139	378	8.0	12.0
2	刘中民		156	455	9.0	13.0
3	周谦君		5	27	3.0	5.0