慢病毒重组ACE2基因表达载体的构建及其感染人脐静脉内皮细胞的研究

• 作者: 卢卓强 晋学庆 王前胜
• 来源期刊: 中国心血管病研究
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素转化酶2 慢病毒表达载体 人脐静脉内皮细胞
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 214-217
• 页数: 4页
• 分类号: R54|Q95-33
• 字数: 4223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5301.2010.03.020

摘要

目的 构建携带血管紧张素转换酶2(ACE2)基因的慢病毒表达载体,观察其感染人脐静脉内皮细胞后ACE2基因的转录及表达水平.方法 采用PCR技术从含有ACE2基因的质粒克隆模板pcDNA3.1-hygro (+)-mACE2上钓取ACE2基因,并将ACE2基因重组到慢病毒载体表达质粒pGC-Fu中,构建重组慢病毒载体表达质粒pGC-FU-ACE2,通过酶切、测序验证ACE2基因后,将pGC-FU-ACE2质粒和包装质粒pHelper 1.0、pHelper 2.0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带ACE2基因的重组慢病毒Lentiviral-ACE2;然后感染人脐静脉内皮细胞,通过RT-PCR、Western-blot检测ACE2基因的转录和蛋白表达水平.结果 成功构建携带ACE2基因的慢病毒表达载体Lentiviral-ACE2,并获得大量高纯度的慢病毒浓缩液.目的基因ACE2能被重组慢病毒高效地导入人脐静脉血管内皮细胞,并能高水平表达.结论 慢病毒表达载体Lentiviral-ACE2成功构建并能高效率感染人脐静脉内皮细胞,为研究ACE2对血管内皮细胞的影响和更深入地探索ACE2基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	晋学庆	福建医科大学附属第一医院心内科	42	314	10.0	16.0
2	王前胜	福建医科大学附属第一医院心内科	2	13	2.0	2.0
3	卢卓强	福建医科大学附属第一医院心内科	13	50	4.0	6.0