表达HCV core-Ant的重组慢病毒的构建

• 作者: 李砚 王亚文 马列婷
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 丙型肝炎病毒核心蛋白 重组慢病毒 分子克隆
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 415-418
• 页数: 4页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文

摘要

目的 构建表达HCV 核心区的重组慢病毒,以探讨HCV感染后该病毒核心蛋白对肝脏干细胞转分化的影响.方法 利用PCR体系延伸互为模板的引物,通过T载体克隆法获得HCV core-Ant基因克隆,酶切后连入pLenti6/V5-D-TOPO质粒,得到pLenti6/V5-D-HCV core-Ant,连同pLP/VSVG、pLP1和pLP2四质粒共转染293ET细胞,获得了表达HCV core-Ant重组慢病毒.收集病毒上清,大量扩增,用免疫组化法检测目的 基因在Hela细胞的表达.用类似的方法构建了表达EGFP的重组慢病毒并测定其滴度.结果 克隆出HCV core-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;使用表达HCV core-Ant重组慢病毒感染Hela细胞,免疫组化实验证实胞浆有HCV core表达.使用表达EGFP的重组慢病毒感染3T3细胞见到绿色荧光,说明构建慢病毒载体有效.结论 通过分子克隆体外重组技术成功制备了表达HCV core的重组慢病毒,为进一步研究丙肝病毒致癌机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马列婷	西安交通大学医学院第一附属医院检验科	37	179	8.0	11.0
2	王亚文	西安交通大学医学院第一附属医院检验科	52	210	8.0	11.0
3	李砚	西安交通大学医学院第一附属医院检验科	2	2	1.0	1.0