苦瓜MAP30基因的克隆表达及对BGC-823细胞形态的影响

• 作者: 田树伟 邵世和 韩军 韩晓红 黄世腾 黄河
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 苦瓜 MAP30 克隆 BGC-823细胞 凋亡 电镜
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 136-140
• 页数: 5页
• 分类号: R979.1
• 字数: 3899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2010.02.010

摘要

目的:克隆苦瓜蛋白MAP30基因,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,初步研究MAP30蛋白对BGC-823细胞的影响.方法:应用PCR技术从苦瓜基因组中扩增出MAP30基因片段,将其TA克隆和双酶切鉴定,再进行测序分析,并构建重组表达载体pET-28a-MAP30,转化到表达菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,用 NTA-Ni2+ 树脂分离纯化所表达的 MAP30 融合蛋白,并经 SDS-PAGE 电泳鉴定;纯化的蛋白作用于 BGC-823 细胞后通过光镜和电镜进行形态学观察. 结果:成功扩增出MAP30基因为861 bp, 与基因库中公布的DQ643967同源性为100%,与DQ643968和S79450的同源性为99%;成功构建 pET-28a-MAP30原核表达重组质粒;通过NTA-Ni2+树脂分离纯化目的蛋白,获得原核表达的大小约为30 000的MAP30融合蛋白,与预测一致;蛋白作用细胞后,细胞形态有明显变化.结论:成功构建pET-28a-MAP30表达载体并获得原核表达的MAP30融合蛋白;重组MAP30蛋白能引起BGC-823细胞明显的形态学变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学基础医学与医学技术学院	99	382	9.0	14.0
2	韩晓红	江苏大学基础医学与医学技术学院	13	80	5.0	8.0
3	黄河	江苏大学生命科学院	13	31	3.0	5.0
4	田树伟	江苏大学生命科学院	6	9	2.0	2.0
5	韩军	江苏大学生命科学院	6	9	2.0	2.0
6	黄世腾	江苏大学基础医学与医学技术学院	5	9	2.0	2.0