新型增殖性腺病毒的构建及对肝癌细胞的抑制

• 作者: 刘凯 吴孟超 岳海燕 张家梅 杨家和 段纪成 王燕玲
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 基因 p53 基因疗法
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 275-278
• 分类号: R73
• 字数: 3619字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2010.04.012

摘要

目的 构建携带p53基因新型增殖性腺病毒CNHK600-p53,研究其对肝癌细胞株抑制效应是否优于Ad-p53.方法 PCR扩增p53基因,利用酶切连接方法 将其插入CNHK600载体,PCR鉴定.经293细胞包装成病毒,抽提病毒DNA,PCR鉴定.氯化铯密度梯度离心法纯化病毒,TCID50 方法 测病毒滴度.病毒增殖实验检测病毒在不同细胞增殖能力.四甲基偶氮唑盐(methyl-thiazolyl tetrazolium assay,MTT)法观察CNHK600-p53、Ad-p53两种病毒分别对肝癌细胞株的抑制率.结果 成功构建新型增殖性腺病毒载体CNHK600-p53;293细胞包装成病毒,PCR方法 鉴定无野生型病毒存在;病毒滴度为1.99×10~（10）pfu/ml;CNHK600-p53在肝癌细胞HepG2、SMMC-7721内复制能力明显高于正常肝细胞HEL-1和L02.对6种肝癌细胞(PLC/PRF5、SMMC7721、HepaG2、BEL-7402、BEL-7404、QGY-7703)而言,随着MOI值的不断增高.其对肝癌细胞的抑制作用也不断增强;在相同MOI情况下,CNHK600-p53组较Ad-p53组的细胞抑制率高(P＜0.05).当细胞抑制率达到80%以上时.两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用新型增殖性腺病毒CNHK600一p53较 Ad-p53能更有效的抑制肝癌细胞,可能成为肝癌的基因治疗更有效的一种基因治疗手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴孟超	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	466	5098	32.0	53.0
2	段纪成	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	18	70	4.0	8.0
3	杨家和	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	36	169	7.0	11.0
4	刘凯	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	24	100	6.0	9.0
5	王燕玲	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	2	0	0.0	0.0
6	张家梅	第二军医大学东方肝胆外科医院综合治疗三科	2	2	1.0	1.0
7	岳海燕	长征医院消化内科	3	1	1.0	1.0