腺病毒介导microRNA-99a过表达抑制肝癌细胞生长

• 作者: 傅思源 刘辉 吕赛群 周伟平 张敬磊 杨远 金华君 钱其军
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-99a 5型腺病毒 肝细胞癌 靶向基因治疗
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 267-271
• 分类号: R735.7|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2012.03.007

摘要

目的:利用腺病毒介导microrRNA-99a( miR-99a)的过表达,观察miR-99a对肝癌细胞生长的抑制作用,探讨一种腺病毒介导miRNA治疗肿瘤的新方法.方法:qRT-PCR检测正常肝细胞系L-02和肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、Hep3B和Huh7细胞中miR-99a的表达,构建含miR-99a的重组5型腺病毒Ad5-miR-99a.用空载腺病毒Ad-blank和Ad5-miR-99a分别感染Huh7细胞,MTT法和集落形成实验检测miR-99a过表达对Huh7细胞生长的抑制作用.结果:与正常肝细胞L02和其他肝癌细胞相比,miR-99a在肝癌Huh7细胞中表达量相对最低(P＜0.01).成功构建重组腺病毒Ad5-miR-99a,Ad5-miR-99a感染Huh7细胞后,miR-99a可在Huh7细胞中稳定高表达.集落形成实验和MTT实验显示,相对于Ad-blank组,Ad5 -miR-99a可显著抑制Huh7细胞的生长和集落形成(P＜0.01).结论:成功构建重组腺病毒Ad5-miR-99a,miR-99a能有效抑制肝癌细胞的增殖,Ad5-miR-99a有可能成为治疗肝癌的新药物.