RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响

• 作者: 倪江涛 易永芬 石海鹏
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 RNA干扰 细胞周期 细胞凋亡 细胞,MKN-28 基因,maspin
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 571-576
• 分类号: R735.2
• 字数: 4720字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.07.004

摘要

目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响.方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin.应用RT-PCR和Western 印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照); pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中 maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01).结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关.