慢病毒载体在大鼠颈动脉球囊损伤模型中的应用及观察

• 作者: 徐盛开 李万强 杨简 江洪 王继春 陈思思 陈静
• 来源期刊: 心肺血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 颈动脉损伤 基因治疗 再狭窄 大鼠
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 145-147,156
• 分类号: R543.4
• 字数: 2772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5062.2010.02.020

摘要

目的:研究携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒转染球囊损伤大鼠颈动脉的效率和可行性,为利用慢病毒载体介导的基因治疗预防血管再狭窄奠定基础.方法:将携带GFP的慢病毒载体(pGC-LV-GFP载体)和慢病毒包装质粒供转染293T细胞,完成慢病毒颗粒包装及滴度测定.包装产生的慢病毒Lenti-GFP转染至球囊损伤的大鼠颈动脉.术后28 d,损伤及病毒转染血管段标本分别行荧光显微镜、光镜检查,评估慢病毒的转染效率及内膜增生情况,并与假手术组(Sham组)、PBS对照组进行比较.结果:经包装产生的Lenti-GFP滴度为2×10 9Tu/mL;术后28 d,Sham组与PBS组血管中膜弹力层仅见微弱的自发性绿色荧光,而Lenti-GFP组动脉壁全层可见较强的绿色荧光分布;PBS组与Lenti-GFP转染组大鼠损伤的颈动脉均可见明显内膜增生,内膜和中膜面积之比差异无统计学意义.结论:Lenti-GFP成功转染至球囊损伤的大鼠颈动脉,并能维持目的基因稳定长期的表达,是血管再狭窄基因治疗的理想载体.