LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离、培养及鉴定

• 作者: 吕原 张洪也 武乃金 程勇 胡祥
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 LoVo细胞株 肿瘤干细胞 干细胞样细胞 CD44/EPCAM
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 149-154
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.02.007

摘要

目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在.方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细胞,接种于添加生长因子的无血清培养基中,观察其增殖过程,继而诱导分化.MTT法、流式细胞术检测CD44+/EPCAMhigh、EPCAMlow和未分选LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布.3种细胞接种裸鼠,比较不同细胞的成瘤率;免疫荧光技术检测小鼠次代CD44+/EPCAMhigh细胞中 CD44/EPCAM的表达.结果:LoVo细胞中有17.4%的CD44+/EPCAMhigh细胞,并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长,且可连续传代;在血清的诱导下,呈贴壁分化生长,其形态与未分选LoVo细胞无差别.CD44+/EPCAMhigh细胞增殖能力高于EPCAMlow细胞及未分选LoVo细胞,且细胞周期多集中在G0/G1期.以500个CD44+/EPCAMhigh细胞接种裸鼠成瘤率为90%(9/10),而1×104个EPCAMlow细胞成瘤率为0(0/10).小鼠移植瘤中次代CD44+/EPCAMhigh细胞仍能少量表达CD44和EPCAM.结论:LoVo细胞中存在CD44+/EPCAMhigh结肠癌干细胞样细胞,CD44+/EPCAMhigh可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究.