乙型肝炎病毒特异性小干扰RNA对转基因小鼠毒副作用的评价

• 作者: 任广立 张卫云 彭智勇 方颖 王鲜艳 许蔓春 赵树进 马恒颢
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 基因治疗 小干扰RNA 毒副作用
• 年，卷（期）: 2010,（22）
• 页码范围: 1708-1711
• 分类号: R725.1
• 字数: 5219字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨基于载体的表达性小干扰RNA(siRNA)对乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠的毒副作用.方法 siRNA表达载体经微静脉注射转染HBV转基因小鼠,设立特异性siRNA组、PBS对照组、阴性质粒对照组及正常Balb/c小鼠对照组.在注射后5 d、12 d、19 d、26 d、33 d、2个月和3个月的不同时间,经其内眦静脉采血检测小鼠ALT水平变化.ELISA方法检测其血清干扰素-α(IFN-α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.Western blot检测其肝脏组织中B细胞淋巴瘤2(Bel-2)、原癌基因(c-Fos)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达变化.采用TUNEL染色检测细胞凋亡,HE染色进行组织病理学观察.结果 基于聚合酶Ⅲ(PolⅢ)的siRNA表达载体与基于聚合酶Ⅱ(PolⅡ)的siRNA表达载体相比,长期作用机体可使转基因小鼠血清ALT水平显著升高(P<0.05);ELISA分析发现IFN-α水平前者似乎高于后苦,但差异无统计学意义(P>0.05).在治疗26 d,直到治疗3个月,特异性siRNA治疗组与PBS对照组相比,TNF-α表达在PolⅢ组表达明显降低(P<0.05);而PolⅡ组TNF-α表达与PBS对照组比较差异无统计学意义.Western blot结果表明肝组织Bcl-2、c-Fos表达显著增加,而Bax表达明显降低(P<0.05),且该组凋亡分析表明细胞凋亡被明显抑制.组织形态学可见肝细胞出现二倍体,核仁增大,核膜清晰可见.结论 基于PolⅢ的siRNA表达载体与PolⅡ的siRNA表达载体相比对肝细胞有一定的毒副作用,凋亡被抑制,细胞增殖失控.过强表达的HBV特异性siRNA可影响机体的生物网络调控,导致增殖与凋亡的失衡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵树进	广州军区总医院药剂科	271	2349	23.0	37.0
2	马恒颢	广州军区总医院儿科	36	121	7.0	10.0
3	张卫云	广州军区总医院检验科	57	343	9.0	16.0
4	许蔓春	广州军区总医院儿科	23	101	5.0	9.0
5	任广立	广州军区总医院儿科	19	110	6.0	9.0
6	王鲜艳	广州军区总医院儿科	8	66	4.0	8.0
7	方颖	广州医学院口腔医院修复科	20	96	5.0	8.0
8	彭智勇	广州军区总医院儿科	2	1	1.0	1.0