小鼠肌肉组织特异性微小RNA miR-133a腺病毒表达载体的构建及表达

• 作者: 王涛 粟永萍 艾国平
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 腺病毒 miR-133a HeLa
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 265-268
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 制备小鼠肌肉组织特异性微小RNA miR-133a的腺病毒表达载体并观察其在HeLa细胞的表达.方法 利用PCR技术从小鼠基因组DNA扩增miR-133a前体对应的基因组片段,克隆到质粒pAdTrack-CMV,而后以同源重组的形式插入到腺病毒表达载体,由人胚肾293细胞包装,获得有感染能力的重组腺病毒颗粒.重组腺病毒感染HeLa细胞后,利用Northern blot检测miR-133a成熟分子的表达.结果 ①成功构建穿梭质粒pAdTrack-miR-133a;②成功构建重组腺病毒质粒pAdeasy-miR-133a;③293细胞包装获得有感染能力的重组腺病毒;④转染的HeLa细胞能够高效表达成熟miR-133a.结论 构建了小鼠miR-133a的腺病毒表达载体,证实其转染HeLa后的表达,为后续研究miR-133a的功能打下了基础.