NgR特异性siRNA筛选及其慢病毒表达载体构建①

• 作者: 刘百峰 吕碧涛 徐行 李春龙 王晓芳
• 来源期刊: 中国伤残医学
• 学科: 医学
• 关键词: Nogo受体 RNA干扰 脊髓损伤 慢病毒
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 99-101
• 页数: 3页
• 分类号: R683
• 字数: 3696字
• 语种: 中文

摘要

目的：筛选出高效的NgR（Nogo受体）特异性siRNA，并构建其慢病毒表达载体。方法：按照E1bashir等设计原则和siRNA的要求，设计、合成4对siRNA，转染体外培养大鼠原代皮层和海马细胞，筛选出基因高沉默效率的NgR特异性siRNA；将获得的高沉默效率siRNA克隆入慢病毒质粒pRNAT-U6．2/Lenti（SD1259），构建NgR特异性siRNA慢病毒表达载体，然后进行酶切鉴定及基因测序。结果：在4对siRNA中筛选出高沉默效率的NgR特异性siRNA199序列，将该序列的发卡式RNA成功克隆入载体pRNAT-U6．1/Neo，构建成NgR特异性siRNA199表达载体，酶切鉴定及基因测序表明设计序列完全相符，目的基因序列准确无误。结论：NgR特异性siRNA199及其慢病毒表达载体构建成功，为进一步观察NgR特异性慢病毒载体RNA干扰抑制大鼠NgR mRNA表达的神经元细胞实验奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕碧涛	第二军医大学上海长征医院骨科	17	137	6.0	11.0
2	王晓芳	大庆市人民医院骨科	14	34	3.0	5.0
3	李春龙	大庆市人民医院骨科	8	20	3.0	4.0
4	刘百峰	大庆市人民医院骨科	7	20	3.0	4.0
5	徐行	大庆市人民医院骨科	2	14	2.0	2.0