SMO特异性siRNA慢病毒载体的筛选构建

• 作者: 华咏 杨波 温机灵 王跃闽 陈卫华
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: SMO基因 RNA干扰 慢病毒
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R737.25
• 字数: 2795字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建特异性沉默SMO基因的重组慢病毒载体,筛选对T293细胞SMO基因表达抑制效率最高的siRNA.方法 根据SMO基因信息,设计了4个小干扰序列和1个阴性对照序列,利用慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP构建了5个重组质粒.用脂质体将重组慢病毒载体转染293T细胞后,Western blot检测沉默效率,从中筛选沉默效率高的质粒载体进行慢病毒颗粒大量包装.结果 测序结果证明4个重组慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP-721、pGCSIL-GFP-722、pGCSIL-GFP-723、pGCSIL-GFP-724的插入序列完全正确,重组慢病毒载体转染293T细胞后,Western blotting证实重组慢病毒质粒载体pGCSIL-GFP-723的干扰效率最高.包装获得Lv-SIL-SMO723慢病毒颗粒.结论 成功筛选获得特异性抑制SMO的siRNA,成功构建了特异性沉默SMO基因慢病毒载体,其产生的慢病毒颗粒能高效特异地沉默SMO基因,为进一步应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨波	同济大学附属东方医院泌尿外科	21	113	6.0	10.0
2	陈卫华	同济大学附属东方医院泌尿外科	10	39	3.0	6.0
3	王跃闽	同济大学附属东方医院泌尿外科	21	88	5.0	8.0
4	温机灵	同济大学附属东方医院泌尿外科	19	73	5.0	7.0
5	华咏	同济大学附属东方医院泌尿外科	10	50	5.0	6.0