大鼠Aggrecanse-1,2特异性shRNA慢病毒表达载体的构建及测序

• 作者: 屠军波 李丽霞 李国光 杨壮群 王丽 王正辉 贺西京
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 慢病毒载体 多聚蛋白聚糖酶-1,2
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1679-1682
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 3108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6455.2007.12.025

摘要

目的:利用RNA干扰技术,以大鼠aggrecanse-1,2基因为靶基因,设计aggrecanse-1,2基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定.方法:根据Tuschl原则设计并合成大鼠aggrecanse-1,2基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ双酶切线性化的pKCSHR-GFP质粒上,转化大肠杆菌DH5 α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定.结果:将合成的8对大鼠aggrecanse-1,2基因特异性DNA寡核苷酸序列退火后,分别克隆到线性化的pKCSHR-GFP载体质粒上.在氨苄青霉素培养基条件下,筛选出相应的阳性菌落,经DNA测序鉴定确定为设计的序列.结论:成功构建了8对大鼠aggrecanse-1,2基因特异性shRNA重组慢病毒表达载体,可进一步用于干扰aggrecanse-1,2基因的mRNA转录,从而为制备aggrecanse-1,2基因表达受抑制的大鼠软骨细胞奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王正辉	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	42	165	7.0	11.0
2	杨壮群	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	84	492	12.0	16.0
3	贺西京	西安交通大学第二医院骨科	297	1900	20.0	32.0
4	屠军波	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	76	376	12.0	15.0
5	王丽	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	104	444	12.0	16.0
6	李丽霞	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	12	24	3.0	4.0
7	李国光	西安交通大学口腔医院口腔颌面整形外科	7	27	3.0	4.0