山羊乳腺特异性表达慢病毒载体的构建与验证

• 作者: 于永生 朴庆林 罗晓彤 金海国
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 人尿激酶原突变体 乳腺特异表达 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2009,（31）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 15177-15179
• 页数: 3页
• 分类号: S827
• 字数: 3497字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.31.035

摘要

[目的]构建山羊乳腺特异性表达尿激酶原突变体的重组慢病毒载体,证明其表达的有效性.[方法]将劳氏肉瘤病毒增强子/启动子、复制缺陷型艾滋病病毒(HIV-1)的5'端长重复序列(LTR)、HIV-1 Ψ包装信号、HIV Rev 反应元件、山羊β-casein调控序列、pro-UK_(M13)、ΔU3/3'LTR依次连接,构建乳腺特异性表达的慢病毒载体;通过体外转染人乳腺癌细胞系(MCF-7)、仓鼠卵巢细胞(CHO)和泌乳山羊乳腺注射证明其表达有效性.[结果]构建的山羊乳腺特异性表达载体酶切鉴定是正确的;利用该载体转染细胞,采用溶圈法和Western blot检测证实了其表达的有效性;慢病毒载体注射到泌乳山羊的乳腺,在乳汁中也检测到了尿激酶原的表达.[结论]为在转基因动物的乳腺中表达尿激酶原突变体奠定了基础.