基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取       
摘要:
目的 构建肝特异性Alb(白蛋白)启动子调控HBEGF(Heparinbinding-epidermal growth factor)表达的慢病毒载体pLV-ATTG.方法 首先以pAlb-Cre-GH/BS为模板,PCR扩增目的基因Alb-enhancer/promoter,In-Fusion克隆至Not Ⅰ酶切的pTRECK6-GFP中,获得pAlbTRECK6(TRECK:toxin receptor-mediated conditional cell knockout);接着以pAlb-TRECK6为模板,PCR扩增Alb-TRECK6,In-Fusion克隆至Xba Ⅰ/BamH Ⅰ酶切的pCD823A-1载体(该载体已卸去EF-1α启动子)中,获得最终的慢病毒载体pLV-ATTG,所构建的质粒均经测序和酶切鉴定.然后按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装.包装成功的慢病毒LV-ATTG感染肝癌细胞株BEL-7402细胞,倒置荧光显微镜检测copGFP表达,并收集细胞提取总RNA,以检测HBEGF表达.结果 酶切鉴定和测序证实成功构建了慢病毒载体pLV-ATTG;LV-ATTG感染BEL-7402细胞后,倒置荧光显微镜下可见绿色荧光,同时qRT-PCR检测结果显示HBEGF转基因能够正常表达.结论 成功构建Alb启动子调控HBEGF表达的慢病毒表达载体,为相关后续研究奠定了坚实基础.
推荐文章
种子特异性启动子研究进展
植物基因工程
种子特异性启动子
结构
种子特异性启动子(napinB promoter)分离、表达载体构建及转基因植物获得
种子特异性启动子
植物表达载体
β_葡萄糖酸苷酶
转基因
烟草
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数  
(/次)
(/年)
文献信息
篇名 构建Alb启动子调控HBEGF肝特异性表达的慢病毒载体及其功能验证
来源期刊 岭南现代临床外科 学科 医学
关键词 Alb HBEGF copGFP 慢病毒载体
年,卷(期) 2016,(3) 所属期刊栏目 论著与临床研究
研究方向 页码范围 254-257
页数 4页 分类号 R73-35|R-332
字数 2469字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-976X.2016.03.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈傍柱 比较医学研究所暨实验动物中心 1 1 1.0 1.0
2 肖东 510515广州 南方医科大学肿瘤研究所 1 1 1.0 1.0
传播情况
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献  (25)
共引文献  (3)
参考文献  (13)
节点文献
引证文献  (1)
同被引文献  (3)
二级引证文献  (1)
1994(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
1999(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2001(2)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(1)
2002(2)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(2)
2003(3)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(2)
2004(6)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(5)
2005(3)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(2)
2006(2)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(2)
2007(3)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(2)
2008(2)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(2)
2009(2)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(2)
2010(4)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(3)
2011(4)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(2)
2012(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2013(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2015(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2016(0)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(0)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(0)
2019(1)
  • 引证文献(1)
  • 二级引证文献(0)
2020(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
Alb
HBEGF
copGFP
慢病毒载体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
岭南现代临床外科
双月刊
1009-976X
44-1510/R
大16开
广州市沿江西路107号中山大学孙逸仙纪念医院
2001
chi
出版文献量(篇)
3834
总下载数(次)
3
总被引数(次)
9418
论文1v1指导