新生仔猪小肠上皮细胞的分离培养和鉴定

• 作者: 仝钢 何雷 刘芳宁 周宏超 张彦明 徐彦召 杨小云 洪海霞 王静
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 新生仔猪小肠上皮细胞 组织块培养 原代培养 鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 92-98
• 页数: 7页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 5461字
• 语种: 中文

摘要

为更快捷地进行猪肠道病毒性、细菌性疾病及细胞永生化的研究提供便利,本研究使用多种酶消化法及其他培养法尝试分离培养肠上皮细胞.结果,利用组织块培养法能成功建立新生仔猪小肠上皮细胞株,获得的上皮细胞具有较强的增殖能力,22 h内贴壁并发生细胞分裂,6～7 d明显增殖,10～12d汇合成单层.连续传代培养至12代,细胞基本失去上皮样特征.倒置显微镜下观察,10代前培养细胞为多角状或卵圆形,单层生长不重叠,呈铺路石状排列,11～12代细胞发生变形,间隙增大.细胞角蛋白18鉴定二者均为阳性.电镜下,纹状缘整齐,紧密连接结构清晰可见.结果表明利用组织块培养法可以获得能够连续传代、活力较好的猪小肠上皮细胞.