截短的人精子特异性乳酸脱氢酶L178X突变体丧失催化活性

• 作者: 兰风华 富显果 张朵 曾健 柯龙凤 颜水堤
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 精子特异性乳酸脱氢酶 LDH-C4 基因突变 LDHC基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 678-682
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文

摘要

精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X突变体的原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC/L178X,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,诱导其表达.对该栽体进行限制性酶切表明,插入的LDHC基因cDNA约1 000 bp;序列分析表明,该插入片段读框正确,带L178X突变.SDS-PAGE及免疫印迹显示,携带该载体的菌体可表达分子量约25 kD的蛋白质,后者可被兔抗LDH-C4血清特异识别.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及活性染色表明,所表达的产物没有LDH活性.本研究成功进行了LDH-C4的1个突变体的原核表达,为研究LDHC基因突变对LDH-C4功能以及男性生育的影响奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾健		7	21	2.0	4.0
2	兰风华		6	8	1.0	2.0
3	富显果		13	24	3.0	4.0
4	颜水堤		1	0	0.0	0.0
5	张朵		2	0	0.0	0.0
6	柯龙凤		1	0	0.0	0.0