凝血因子Ⅴ及凝血因子Ⅷ联合缺陷患者四例的基因诊断

• 作者: 丁秋兰 奚晓东 戴菁 王学锋 王鸿利 许冠群 陆晔玲 黄丹丹
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 因子Ⅴ缺乏 因子Ⅷ缺乏 膜蛋白质类 甘露糖结合外源凝集素 膜泡运输蛋白质类 系谱
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 618-624
• 分类号: R5
• 字数: 4754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.07.008

摘要

目的 对4例FⅤ及FⅧ联合缺陷患者及其家系成员进行基因诊断及分子发病机制研究.方法 测定先证者及家系成员APTT、PT、FⅧ:C及FⅤ:C等进行表型诊断;采用凝血酶生成试验检测先证者及健康对照者的凝血酶生成情况;Tiangen试剂盒法抽提先证者及家系成员全血基因组DNA;平衡酚-乙醚法抽提羊水DNA;PCR扩增4例先证者及家系成员的LMAN1基因及MCFD2基因,用末端标记双脱氧法检测核酸序列查找基因突变.结果 先证者1的APTT显著延长,为88.2 s,PT 延长至19.6 s,FⅧ:C降至24.2%,FⅤ:C为9.1%.先证者2与先证者3为亲姐妹,两人的APTF均明显延长,分别为71.6 s及74.6 s,PT分别延长至22.1 s及18.3 s,FⅧ:C均降低,分别为25%及19.6%,FⅤ:C分别降至7.6%及14.5%.先证者4的AFTT及PT均延长,分别为70.3 s及18.2 s,其FⅦ:C降至15.7%,FV:C降至9.4%,4例先证者的其余实验室表型检测指标均正常,临床诊断为FⅤ及FⅧ联合缺陷性疾病.对先证者1进行LMAN1及MCFD2基因直接测序,显示其LMAN1基因存在双杂合突变:突变1位于第8号外显子,为插入突变:nt912insA(X71661.1),导致第305位氨基酸发生移码突变,并在编码20个氨基酸后终止,其母亲该位点亦为杂合突变;先证者1的另一个杂合突变位于第11号外显子:nt1366C>CT(X71661.1),导致第456位精氨酸发生无义突变(p.Arg456X),其父亲及胎儿该位点均为杂合突变.先证者1及其父母的MCFD2基因测序均未发现突变.先证者2及3的LMAN1基因测序均未发现突变,MCFD2基因直接测序检测发现两者均在该基因的第4号外显子处存在1个纯合突变:nt411T>C(NM_139279),导致第136位异亮氨酸突变成苏氨酸(p.Ile136Thr).先证者2的女儿该位点为杂合突变.先证者4的LMAN1基因测序显示其在该基因的第5号外显子存在1个纯合突变:nt615C>T,导致第202位的精氨酸无义突变;其MCFD2基因测序未发现突变.凝血酶生成试验检测显示4例FⅤ及FⅧ联合缺陷患者的凝血酶生成潜力较健康对照者均有不同程度的下降.结论 先证者1是由LMAN1基因的双杂合突变nt1366C>CT及nt912insA引起,突变分别遗传自其父亲及母亲,对其母亲进行产前基因诊断发现胎儿为1名女性携带者,该胎儿遗传了其父亲的1个杂合突变nt1366C>CT.先证者2及3是由MCFD2基因上的纯合突变(nt411T>C,p.ne136Thr)所导致的.先证者2的女儿遗传了其母亲的一个杂合突变,为携带者.先证者4是由LMAN1基因的纯合无义突变(nt615C>T,p.Arg202X)所导致的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁秋兰	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	61	169	6.0	10.0
2	王学锋	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	126	552	10.0	18.0
3	奚晓东	上海交通大学医学院基因组学国家重点实验室	16	29	3.0	4.0
4	戴菁	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	32	103	6.0	8.0
5	陆晔玲	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	19	65	5.0	7.0
6	许冠群	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	16	28	4.0	4.0
7	黄丹丹	上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科	4	17	2.0	4.0