通过睾丸内注射转染外源DNA在小鼠精子的表达

• 作者: 于明举 惠楠 李文杰 王岭斌 谢畅 赵永聚
• 来源期刊: 动物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: pEGFP 睾丸注射 精子介导基因转移 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础资料
• 页码范围: 151-157
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因小鼠(Mus musculus)的可行性,并探讨注射DNA的最佳浓度.将环形的质粒DNA pEGFP-N_1与脂质体混合制备DNA-脂质体复合物,按DNA浓度不同分为0.08μg/μl、0.12 μg/μl和0.24 μg/μl 3组,分别注射入成年SPF级昆明小鼠睾丸内,同时设空白对照;每组处理公鼠2只,注射5 d后每只与3只成年母鼠同笼,20 d后在荧光显微镜下检测公鼠附睾精子,并制作睾丸石蜡切片,检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达;PCR法检测各组后代阳性率.结果显示,3组小鼠附睾荧光精子比例分别为9.09%、47.06%和27.78%.3组小鼠的睾丸石蜡切片中均可看到不同强度的GFP表达.后代经PCR检测阳性率分别为17.26%、47.61%和22.11%.本实验证实了睾丸注射法能使外源DNA整合进入精子基因组,并能在自身和后代中得到表达,本研究中外源DNA注射浓度以0.12μg/μl效果为最佳.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵永聚	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	52	224	9.0	12.0
2	于明举	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	8	35	4.0	5.0
3	王岭斌	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	6	34	4.0	5.0
4	谢畅	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	6	22	2.0	4.0
5	惠楠	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	1	17	1.0	1.0
6	李文杰	西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室	1	17	1.0	1.0