转化生长因子βⅠ型受体基因的靶向小干扰RNA抑制肝星状细胞合成胶原的体外研究

• 作者: 俞富军 林镯 楼迪栋 董培红 陈永平
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体 转化生长因子β RNA 小分子干扰 肝硬化 星形细胞 质粒 胶原
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2010.01.002

摘要

目的 观察大鼠转化生长因子βⅠ型受体(TβR Ⅰ)基因的靶向小干扰RNA(siRNA)表达质粒对肝星状细胞(HSC)合成胶原的影响.方法 根据大鼠Tβ R Ⅰ的基因序列,设计并构建3个大鼠TβR Ⅰ基因的靶向siRNA表达质粒,以脂质体作转染试剂,将siRNA表达质粒分别转染至HSC-T6细胞中,RT-PCR和Western印迹技术分析TβRⅠ mRNA及蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,放射免疫法测HA、PCⅢ含量.采用LSD法进行统计学处理.结果 酶切证实siRNA的目的 基因片段已成功克隆入载体中.与空白对照组比较,转染siRNA表达质粒后,3组HSC-T6细胞TβR Ⅰ mRNA表达水平均抑制,其中以psiRNA2组抑制作用最强(psiRNA1组:t=7.354,P＜0.01;psiRNA2组:t=9.214,P＜0.01;psiRNA3组:t=5.967,P＜0.01).3组TβRⅠ蛋白表达水平均降低,以psiRNA2组降低最明显(psiRNA1组:t=6.324,P＜0.01;psiRNA2组:t=8.741,P＜0.01;psiRNA3组:t=4.128,P＜0.01).3组HSC-T6细胞增殖活性均下降,合成胶原均减少,以psiRNA2组最明显;而转染无关siRNA组无明显变化.结论 构建的TβR Ⅰ siRNA表达质粒可抑制HSC-T6细胞合成胶原,为肝纤维化基因治疗提供新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈永平	温州医学院附属第一医院感染内科	218	966	13.0	19.0
2	董培红	温州医学院附属第一医院感染内科	33	252	10.0	14.0
3	俞富军	温州医学院附属第一医院感染内科	14	39	4.0	5.0
4	楼迪栋	温州医学院基础医学院病理学教研室	7	7	2.0	2.0
5	林镯	温州医学院附属第一医院感染内科	24	61	5.0	6.0