检测水体日本血吸虫毛蚴PCR方法的建立

• 作者: 梁幼生 沈海英 王廷安 王文波 王本敬 申云侠 诸葛洪祥
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 毛蚴 PCR 痕量检测 预警
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 562-564
• 分类号: R383.2
• 字数: 2414字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.06.013

摘要

目的 建立一种灵敏、特异的痕量检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法.方法 取感染6~8w日本血吸虫的小鼠肝脏, 碾磨后沉淀, 孵化并利用间接连续离心法富集毛蚴,采用蛋白酶K-苯酚法提取毛蚴基因组DNA.登陆GenBank查询获得日本血吸虫保守序列18S小亚基单位核糖体脱氧核酸(18S rDNA)基因, 利用引物设计软件Primer Premier 5.0和Oligo 6自主设计一对引物,建立检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法.梯度稀释血吸虫毛蚴基因组DNA进行PCR方法的灵敏性试验,设置阴性对照,PCR产物通过电泳鉴定.结果 PCR扩增日本血吸虫毛蚴得到特异性DNA片段,片段长度为463bp,阴性对照组无扩增产物.PCR法可检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为62.5 pg/μL.结论 建立的检测日本血吸虫毛蚴PCR方法灵敏、特异,具有一定的预警作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁幼生		87	1503	22.0	34.0
2	王廷安	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	4	16	2.0	4.0
3	沈海英	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	8	82	2.0	8.0
4	申云侠	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	3	13	2.0	3.0
5	王文波	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	1	2	1.0	1.0
6	王本敬	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	1	2	1.0	1.0