基因治疗导入微小RNA沉默肌腱细胞转化生长因子基因的体外研究和体内应用

• 作者: 吴亚芳 周友浪 曹怡 汤锦波 陈传好
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因沉默 基因表达调控 转化生长因子β
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 293-298
• 页数: 6页
• 分类号: R6
• 字数: 5769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2352.2010.03.014

摘要

目的 探讨微小RNA(miRNA)导入肌腱细胞和损伤肌腱沉默转化生长因子(TGF)β基因的作用及对Ⅰ、Ⅲ型胶原和结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的影响.方法 针对鸡TGF β1基因的mRNA序列,合成4对miRNA TGF β1 DNA序列和一对不编码序列,分别插入至miRNA质粒载体中,获得5个miRNA TGF β1质粒载体,并分别命名为miRNA #1、#2、#3、#4和阴性对照.采用实时PCR技术检测并分析miRNA导入肌腱细胞后TGF β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达变化.在转基因治疗肌腱1周和6周后,检测TGF β1、Ⅰ、Ⅲ型胶原和CTGF基因在体内损伤肌腱中的表达.结果 与阴性对照细胞组相比,实时PCR结果分析显示:miRNA #1和#2质粒载体治疗的细胞组TGF β1基因表达分别下降了68%和43%;在miRNA #1治疗的细胞组,Ⅲ型胶原和CTGF基因表达分别下降70%和68%.使用miRNA #1干扰质粒转基因至体内损伤肌腱结果显示:术后1周,TGF β1基因表达下降67%,而Ⅰ、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达未变化;术后6周,TGF β1和Ⅲ型胶原基因表达分别下降56%和58%.结论 miRNA导入肌腱细胞后TGF β1、Ⅲ型胶原和CTGF基因表达显著下降.导入miRNA至活体损伤肌腱后1周,TGF β1基因表达显著下降;术后6周,TGF β1和Ⅲ型胶原基因表达显著下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤锦波	南通大学附属医院手外科	28	195	9.0	12.0
2	吴亚芳	南通大学附属医院手外科	8	16	3.0	3.0
3	陈传好	南通大学附属医院手外科	3	5	1.0	2.0
4	曹怡	南通大学附属医院手外科	3	5	1.0	2.0
5	周友浪	南通大学附属医院手外科	5	4	1.0	1.0