RNA干扰沉寂Bcl-xL基因对肝癌细胞HepG-2生物学行为的影响

• 作者: 段梦夕 袁宏
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Bcl-xL 肝癌
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 98-101
• 分类号: R735.7|Q753
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2010.03.034

摘要

目的 利用短发夹RNA(shRNA)在肝癌HepG-2细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制Bcl-xL基因表达,探讨对肝癌细胞HepG-2生长和凋亡的影响.方法 构建Bcl-xL靶向的shRNA,用脂质体LipofectamineTM2000转染入肝癌细胞HepG-2.经RT-PCR和流式细胞术分别检测shRNA对Bcl-xL mRNA和蛋白水平的抑制效应,采用MTT,TUNEL等技术检测 shRNA处理前后细胞生物学行为的变化.结果 与未转染组相比,shRNA能够有效的抑制Bcl-xL基因表达,mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为86.6%和70.2%;肝癌细胞生长明显减慢,转染对照组(HepG-2 hk)和未转染组(HepG-2-w)细胞的生长曲线较为接近,说明转染非特异性shRNA后的细胞增殖特性未受到影响(P>0.05);而转染组的细胞(HepG- 2-si)增殖曲线位于前两者的下方,细胞增殖特性发生明显改变,差异有统计学意义(P<0.05);凋亡明显增加,HepG-2-si组细胞每视野凋亡数为15.0±1.1,HepG-2-w,HepG-2 hk组细胞凋亡数分别为1.7±1.0和3.2±1.2.HepG-2-si与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异具有统计学显著性意义(P<0.01),而HepG-2 hk组与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 RNAi在体外明显抑制了肝癌细胞中Bcl-xL基因的表达和肿瘤细胞增殖,这种抑制作用是通过细胞凋亡增加实现的,为开辟Bcl-xL靶向的RNA干扰治疗肝癌提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁宏	大连医科大学附属第一医院检验科	50	311	10.0	14.0
2	段梦夕	大连医科大学附属第一医院检验科	12	45	4.0	5.0