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摘要:
目的 利用短发夹RNA(shRNA)在肝癌HepG-2细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制Bcl-xL基因表达,探讨对肝癌细胞HepG-2生长和凋亡的影响.方法 构建Bcl-xL靶向的shRNA,用脂质体LipofectamineTM2000转染入肝癌细胞HepG-2.经RT-PCR和流式细胞术分别检测shRNA对Bcl-xL mRNA和蛋白水平的抑制效应,采用MTT,TUNEL等技术检测 shRNA处理前后细胞生物学行为的变化.结果 与未转染组相比,shRNA能够有效的抑制Bcl-xL基因表达,mRNA和蛋白表达明显降低,抑制率分别为86.6%和70.2%;肝癌细胞生长明显减慢,转染对照组(HepG-2 hk)和未转染组(HepG-2-w)细胞的生长曲线较为接近,说明转染非特异性shRNA后的细胞增殖特性未受到影响(P>0.05);而转染组的细胞(HepG- 2-si)增殖曲线位于前两者的下方,细胞增殖特性发生明显改变,差异有统计学意义(P<0.05);凋亡明显增加,HepG-2-si组细胞每视野凋亡数为15.0±1.1,HepG-2-w,HepG-2 hk组细胞凋亡数分别为1.7±1.0和3.2±1.2.HepG-2-si与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异具有统计学显著性意义(P<0.01),而HepG-2 hk组与HepG-2-w组间细胞凋亡数差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 RNAi在体外明显抑制了肝癌细胞中Bcl-xL基因的表达和肿瘤细胞增殖,这种抑制作用是通过细胞凋亡增加实现的,为开辟Bcl-xL靶向的RNA干扰治疗肝癌提供实验基础.
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文献信息
篇名 RNA干扰沉寂Bcl-xL基因对肝癌细胞HepG-2生物学行为的影响
来源期刊 现代检验医学杂志 学科 医学
关键词 RNA干扰 Bcl-xL 肝癌
年,卷(期) 2010,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 98-101
页数 分类号 R735.7|Q753
字数 3150字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-7414.2010.03.034
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 袁宏 大连医科大学附属第一医院检验科 50 311 10.0 14.0
2 段梦夕 大连医科大学附属第一医院检验科 12 45 4.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
RNA干扰
Bcl-xL
肝癌
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
现代检验医学杂志
双月刊
1671-7414
61-1398/R
大16开
西安市友谊西路256号陕西省人民医院内
52-116
1986
chi
出版文献量(篇)
6791
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18
总被引数(次)
21095
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