角蛋白KRT18对LRP16亚细胞定位的影响

• 作者: 伍志强 孟元光 尹肖云 杨洁 赵亚力 韩为东
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 LRP16 角蛋白18 乳腺癌 核浆分布
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 25-31
• 页数: 7页
• 分类号: R730
• 字数: 5182字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2010.01.008

摘要

目的:通过构建LRP16绿色荧光蛋白(GFP)融合子,观察LRP16蛋白在乳腺癌MCF-7、小鼠成纤维NIH3T3细胞株中的亚细胞定位,研究角蛋白18(Cytokeratin 18 ,KRT18)对LRP16亚细胞定位的影响,并利用Western-blot对KRT18能够调控LRP16核浆穿梭进一步验证.方法:构建真核表达载体pEGFP-LRP16,经脂质体介导pEGFP-LRP16质粒单独转染,与携带KRT18基因的Flag-pCDNA3-KRT18质粒共同转染NIH3T3、MCF-7细胞,荧光显微镜观察LRP16的亚细胞分布变化.Western-Blot法进一步验证在KRT18过表达和小干扰(siRNA)技术沉默掉KRT18后对内源性LRP16蛋白核浆分布的影响.结果:成功构建pEGFP-LRP16融合载体,荧光显微镜观察LRP16蛋白在MCF-7细胞呈核型分布为主,在NIH3T3细胞呈浆型分布为主.与KRT18共同转导后LRP16亚细胞分布趋向细胞浆.Western blot分析证实角蛋白18会介导内源性LRP16由核向浆穿梭的生物学功能.结论:KRT18通过与LRP16相互作用将LRP16扣留在细胞浆,是影响LRP16亚细胞分布的关键因子.为进一步研究KRT18对LRP16翻译后核功能执行的调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亚力	解放军总医院分子生物室	93	443	10.0	17.0
2	孟元光	解放军总医院妇产科	133	638	12.0	19.0
3	韩为东	解放军总医院分子生物室	113	744	13.0	23.0
4	伍志强	解放军总医院分子生物室	47	114	6.0	9.0
5	杨洁	解放军总医院分子生物室	90	466	11.0	18.0
6	尹肖云		1	2	1.0	1.0