膜结合型HLA-G1～G4分子的克隆表达及对NK细胞杀伤功能的影响

• 作者: 林爱芬 许惠惠 颜卫华
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HLA-G 异构体 转染 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 982-986
• 分类号: R3
• 字数: 4769字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.11.002

摘要

目的 探讨膜结合型HLA-G1～G4异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响.方法 通过基因克隆及转染,分别建立稳定表达HLA-G1～G4抗原的人绒癌JAR细胞株.采用RTPCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达.通过加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽,观察对HLA-G表达的影响.LDH释放法检测HLA-G1～G4表达对NK细胞杀伤活性的影响.结果 RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学结果显示,HLA-G1～G4/pVITRO2-mcs重组质粒成功转染HLA-G表达阴性的人绒癌JAR细胞株.FACS分析显示HLA-G1抗原能在JAR-HLA-G1细胞株表面表达,HLA-G2～G4抗原不能有效到达细胞表面.体外杀伤试验发现表达HLA-G1～G4抗原的细胞均能抑制NK细胞的杀伤活性(P＜0.05);加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽对HLA-G表达无明显影响,对NK细胞杀伤抑制程度也未见明显改变.结论 HLA-G1～G4能够明显抑制NK细胞的杀伤活性,提示不同膜结合型HLA-G异构体分子均能作为免疫耐受分子,具备免疫调节功能.