斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF146基因的克隆、表达与启动子活性分析

• 作者: 张志芳 朱江 朱越雄 李轶女 盛晔 闵丹
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜纹夜蛾 核型多角体病毒 ORF146基因 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1600-1606
• 分类号: Q933
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究斜纹夜蛾核型多角体病毒II ORF146基因的结构与功能.[方法]根据SpltMNPV IIORF146基因序列设计引物,经PCR扩增克隆ORF146基因.在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析.构建ORF146片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体.[结果]核苷酸序列分析表明,读码框含1383 bp,编码460个氨基酸的蛋白质,推定分子量为50.4 kDa.启动子活性分析和转录时相分析都表明该基因是个早、晚期都表达的基因,在病毒感染8 h和18 h有两个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但趋于稳定.pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1:3200以上.[结论]SpltMNPV Ⅱ ORF146基因是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因.推测ORF146基因可能与SpltMNPV Ⅱ病毒感染宿主细胞后病毒DNA复制有关.制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱江	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	114	733	13.0	22.0
2	朱越雄	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	73	491	13.0	19.0
3	张志芳	中国农业科学院生物技术研究所	76	600	14.0	20.0
4	李轶女	中国农业科学院生物技术研究所	52	364	10.0	17.0
5	盛晔	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	9	47	4.0	6.0
9	闵丹	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	2	5	2.0	2.0