不同细胞裂解液提取总蛋白在免疫印迹中的效果分析

• 作者: 何涛 刘晓燕 张永亮 李娟 王丽
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞裂解液 蛋白提取 免疫印迹 MCF-7
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 367-369
• 分类号: Q533
• 字数: 2427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2010.04.005

摘要

目的:寻找一种适合乳腺癌细胞MCF-7蛋白提取的裂解液配方用于免疫印迹分析.方法:配制两种不同的细胞裂解液A与B,分别对培养的密度相当的人乳腺癌细胞MCF-7进行总蛋白的提取,Bradford法测蛋白含量,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测β-actin和Twist的表达,比较2种裂解液裂解效果.结果:2种细胞裂解液均可满足免疫印迹分析的要求,B液提取的蛋白含量虽比A液高,但A液用于免疫印迹检测β-actin和Twist的效果更佳.结论:免疫印迹分析结果显示:A细胞裂解液(50 mM pH 7.4 Tris-HCl,150 mM NaCl,0.1% SDS,1% NP-40,1 mM EDTA,临用前加入PMSF使终浓度为1mM)可作为提取乳腺癌细胞MCF-7中蛋白的一种理想配方.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽	泸州医学院医学分子生物学实验室	79	179	7.0	8.0
2	李娟	泸州医学院医学分子生物学实验室	51	223	8.0	13.0
3	何涛	泸州医学院医学分子生物学实验室	112	491	13.0	18.0
4	刘晓燕	泸州医学院医学分子生物学实验室	85	249	8.0	12.0
5	张永亮	泸州医学院医学分子生物学实验室	2	13	2.0	2.0