细胞ATP检测试剂的优化及其灵敏度的测定

• 作者: 乔录新 孙玉 寇卜心 柳雅立 石英 计云霞 陈德喜 魏飞力
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: ATP 优化 灵敏度
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 2601-2603
• 分类号: Q786
• 字数: 2298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-1815.2010.11.004

摘要

为配制细胞ATP检测试剂并检测其灵敏度,按照常规报告基因分析试剂配制方法,将其中主要成分Luciferase(荧光素酶)和Luciferin(荧光素)及ATP浓度进行倍比稀释后找到最适合反应的最佳浓度值;按照最佳浓度配制反应液,将ATP浓度倍比稀释测定报告基因数值并绘制标准曲线,分析检测灵敏度;另外选取肿瘤细胞株H1299,倍比稀释后裂解细胞应用配制好的反应液进行ATP检测,分析最低检测细胞数.结果:Luciferase和Luciferin最佳反应浓度分别为1.25 μg/mL和87.5 μmol;按照最佳浓度配制反应液后,绘制ATP浓度标准曲线,找到ATP检测最低线为10-12 mol/L,可以检测到H1299细胞最低值为100个.说明本实验配制的细胞ATP检测试剂灵敏度高具有良好的应用价值.