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摘要:
目的 构建携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)及CXCR4慢病毒载体,并实现其在大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)中的表达,观察转CXCR4基因后对rMSCs迁移能力的影响. 方法 RT-PCR扩增大鼠CXCR4编码区片段,将其插入慢病毒载体质粒PNL-IRES2-EGFP,获得的PNL-CXCR4-IRES2-EGFP与包装及包膜质粒用脂质体法共转染293T细胞,包装生产慢病毒.所获慢病毒转染rMSCs后,用RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光组织化学和流式细胞术检测转CXCR4基因rMSCs组、转空载体rMSCs组中CXCR4表达情况.利用Transwell方法检测两组rMSCs在SDF-1作用下的迁移能力. 结果 双酶切和测序证实,PNL-CXCR4-IRES2-EGFP构建正确,转CXCR4基因rMSCs组CXCR4表达明显增多,在SDF-1α作用下迁移能力明显增强. 结论 成功构建带有EGFP和大鼠CXCR4的慢病毒载体,并获得CXCR4-rMSCs基因工程细胞,为深入研究SDF/CXCR4轴在rMSCs向损伤组织定向迁移中的作用奠定了基础.
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文献信息
篇名 共表达EGFP和CXCR4的大鼠骨髓间充质干细胞的构建及其迁移能力
来源期刊 基础医学与临床 学科 生物学
关键词 CXCR4 EGFP 慢病毒 骨髓间充质干细胞 迁移
年,卷(期) 2010,(7) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 737-742
页数 分类号 Q785
字数 3924字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 吴秀丽 福建医科大学附属第一医院神经病学研究所 30 205 9.0 13.0
5 张志坚 福建医科大学附属第一医院神经病学研究所 78 420 11.0 16.0
9 俞晓岚 福建医科大学附属第一医院神经病学研究所 2 2 1.0 1.0
10 黄志新 福建医科大学附属第一医院神经病学研究所 1 1 1.0 1.0
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骨髓间充质干细胞
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基础医学与临床
月刊
1001-6325
11-2652/R
大16开
北京东单三条5号
82-358
1981
chi
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