反相高效液相色谱法测定人乳腺癌MCF7细胞中基因组DNA甲基化水平

• 作者: 乔莹 刘楠 姜奕 蔡鑫泽 车睿超 都姝妍 陈冬
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 反相高效液相色谱法 基因组 甲基化水平 乳腺癌
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 898-900,903
• 分类号: O657.72|Q523
• 字数: 2674字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用反相高效液相色谱法检测MCF7细胞系中基因组DNA的甲基化水平.方法 采用Nano LC(75 μm×15 cm,5 μm)和Micro LC(1.0 mm×15 cm,5 μm)的C18反相色谱柱,以甲醇-醋酸铵缓冲液(pH 5.0)为流动相,使用线性梯度程序,将MCF7细胞中基因组DNA水解产物进行分离,两种体系流速分别是300 nl/min和40μl/min,在273 nm波长处检测,利用外标法分别检测DNA中脱氧胞嘧啶(dC和甲基化脱氧胞嘧啶(5mdC)含量.结果 MCF7基因组DNA的水解产物,经反相色谱分离得到的峰图有较好的准确性与重复性;DNA水解后的产物为弱保留化合物,且Micro LC分离效果优于Nano LC;乳腺癌细胞MCF7甲基化水平为19.3%,高于正常细胞中基因组DNA甲基化水平.结论成功的将MCF7细胞中基因组DNA水解产物经反相色谱分离;使用Micro LC分离DNA水解后的弱保留产物较佳;MCF7细胞系基因组DNA甲基化水平高于正常细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜奕	中国医科大学附属第一医院中心实验室	46	133	5.0	8.0
2	刘楠	中国医科大学附属第一医院中心实验室	50	210	9.0	11.0
3	陈冬	中国医科大学附属第一医院中心实验室	12	31	4.0	4.0
4	蔡鑫泽	中国医科大学附属第一医院中心实验室	10	22	3.0	4.0
5	都姝妍	中国医科大学附属第一医院中心实验室	16	46	5.0	6.0
6	乔莹	中国医科大学附属第一医院中心实验室	9	37	4.0	5.0
7	车睿超	中国医科大学附属第一医院中心实验室	1	4	1.0	1.0