RNA干扰Rbl-2基因调控DNA甲基化转移酶介导心脏干细胞凋亡

• 作者: 余细勇 夏慧苏 朱杰宁 李晓红 林曙光 林秋雄 麦丽萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜母细胞瘤样蛋白质2 DNA甲基化转移酶 心脏干细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 2306-2310
• 分类号: R363
• 字数: 4195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.12.004

摘要

目的:视网膜母细胞瘤样蛋白2(Rbl-2)在调控DNA甲基化转移酶(DNMT)中发挥重要作用,而DNMT影响干细胞的分化.本文旨在探讨调控Rbl-2基因的表达对心脏干细胞凋亡的影响.方法:分离培养人心脏干细胞,转染Rbl-2 siRNA.采用real time RT-PCR检测Rbl-2和DNMT-3B mRNA表达水平,Western blotting检测DNMT-3B蛋白表达和caspase-3活化片段,并以Annexin V-FITC/PI双染色-流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:在人心脏干细胞中,转染siRNA后Rbl-2 mRNA表达水平与阴性对照组相比显著降低(P<0.01),同时DNMT-3B mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组相比均显著升高(P<0.01),差异显著.与阴性对照组相比,转染Rbl-2 siRNA的人心脏干细胞caspase-3激活, 表现为caspase-3活性片段与caspase-3前体的比值显著增高(P<0.01),annexin V阳性细胞凋亡率上升(P<0.05).结论:Rbl-2基因在心脏干细胞的生存中具有正性调控作用,抑制其表达能促进心脏干细胞的凋亡,其调控机制与表观遗传学的修饰密切相关.